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1.Bioalternatives, Gençay, France

Samuel Guenin1, Julien Garnier1, Christine Barrault1, Nathalie Pedretti1, Sevda Cordier-Dirikoc1, François-Xavier Bernard1

androgen-sensitive sebocyte cell line.

Pharmacological effects of anti-androgens and other compounds in an

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INTRODUCTION & HYPOTHESIS

We previously described the effects and behaviour of the main circulating active androgen testosterone (Testo) and its main active intracellular metabolite DHT in an androgen sensitive sebocytes (abstract X, SID, 2019). Testo and DHT readily induce 1) androgen receptor (AR) translocation, 2) expression of target genes and then 3) a lipogenic differentiation program. DHEA is not significantly transformed into Testo, had no significant androgenic (agonist), nor anti-androgenic (antagonist) effect by itself in the tested conditions.
Here we analysed the activity of reference anti-androgens (Finasteride, Dutasteride, Cyproterone acetate), at the level of their potential targets (5-alpha-reductase, AR translocation, induced transcripts) and in a functional lipid accumulation assay. We also evaluated this androgen-induced lipid accumulation assay as a potential pharmacological tool to detect potential inhibitors from both androgenic and non-androgenic origins.

The androgen sensitive sebocytes should allow to characterize both the activity and the mechanism of action of anti-androgen drugs. These anti-androgens may act at the level of androgen metabolism, AR translocation, AR nuclear activity and thus may have (or not) a functional effect on androgen-induced lipogenic differentiation of these cells. If we focus on these functional effects, other (non-androgenic) potential cell metabolism modulators may also work.

MATERIALS & MEHODS

[14C]-Testo metabolism was analysed after incubation with cell cultures at different times and extraction, chromatography/phosphorimaging2. RASD1 expression was measured by RT-qPCR1.
AR translocation was followed by immunofluorescence1. Lipid accumulation was evidenced by incubation with the fluorescent probe Bodipy®1. Automated photography and image analysis was performed using an INCell AnalyzerTM 2200 (GE Healthcare). The tested compounds are listed in fig 3.

RESULTS

1 – Effects of Dutasteride, Finasteride and CypAc on [14C]-Testo metabolism (A) and DHT production (B); 24h assay.

DHT PRODUCTION

2 – (A) Effects of Dutasteride, Finasteride and CypAc on RASD1 expression after 4 h stimulation with DHT or Testo – (B) Effects of drugs (1µM) on AR translocation (1h assay with DHT) – Effects of drugs (1µM) on lipid accumulation (7days assay, with DHT or Testo).

Download the full version of the poster to see all the results

CONCLUSIONS

In this model,

– Dutasteride is a strong inhibitor of DHT production (1000-fold more active than Finasteride).

– CypAc strongly inhibits the transcription of AR-dependent genes induced by DHT or Testo, without interfering with AR translocation (nuclear effects).

– CypAc is not as effective as expected on the functional lipid accumulation assay. Dutasteride is active in the lipid accumulation assay even in the presence of DHT as inducer, indicating potential additional targets than 5-α-reductase. Taken together it indicates that there is no direct correlation between early inhibitory processes and the final functional effects after 7 days.

– The androgen lipid accumulation assay is suitable for high throughput testing of various compounds with various mechanisms of action, including anti-androgens, cell metabolism inhibitors, etc. Among other, mTOR inhibitors are effective. In these experimental conditions, isotretinoin, which is a reference treatment for acne does not interfere with this androgen-stimulated lipid accumulation (even shows an opposite effect).

REFERENCES

1 Barrault et al. (2015) J Steroid Biochem Mol Biol ;152:34-44
2 Bernard et al. (2000) Int J Cosmet Sci ;22:397-407

Behavior of the two circulating androgens testosterone and DHEA and their main intracellular metabolites in an androgen-sensitive sebocyte cell line.

Acne, Sebaceous gland regulation

Androgens are known to strongly regulate the sebaceous gland. Relationships with testosterone have been reported and little is known about the role of DHEA. We showed that the most potent intracellular androgen metabolite, dihydrotestosterone (DHT), induced AR translocation, specific transcripts such as ras-related dexamethasone induced 1 (RASD1) and lipogenesis/lipid storage. We used these parameters to assess the behaviour and activity of the two main circulating androgens TESTO and DHEA, in comparison with DHT, in this model.

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https://qima-lifesciences.com/wp-content/uploads/2019/05/190527_Poster2_petit.png 368 655 Vanessa https://qima-lifesciences.com/wp-content/uploads/2021/10/QIMA_life_sciences@4x1.png Vanessa2019-05-22 14:38:092019-11-12 17:46:23Behavior of the two circulating androgens testosterone and DHEA and their main intracellular metabolites in an androgen-sensitive sebocyte cell line.

Innate immunity activation of sebocyte cells by living bacteria. Evidence of a potential immunosuppressive effect of DHT.

Acné, Acne, Microbiome cutané, Microbiome cutané, Microbiome cutané, Sebaceous gland regulation

Acne is a skin pathology targeting the pilosebaceous unit…sebum hypersecretion and bacterial infection. We studied the effects of living bacteria on the induction of an innate immune response in a sebocyte cell line.

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https://qima-lifesciences.com/wp-content/uploads/2019/05/190527_Poster1_petit.png 368 655 Vanessa https://qima-lifesciences.com/wp-content/uploads/2021/10/QIMA_life_sciences@4x1.png Vanessa2019-05-22 14:37:542019-11-12 17:58:17Innate immunity activation of sebocyte cells by living bacteria. Evidence of a potential immunosuppressive effect of DHT.

Pharmacological effects of anti-androgens and other compounds in an androgen-sensitive sebocyte cell line.

Acné, Acne, Sebaceous gland regulation

We analysed the activity of reference anti-androgens (Finasteride, Dutasteride, Cyproterone acetate), at the level of their potential targets (5-alpha-reductase, AR translocation, induced transcripts) and in a functional lipid accumulation assay. We also evaluated this androgen-induced lipid accumulation assay as a potential pharmacological tool to detect potential inhibitors from both androgenic and non-androgenic origins.

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https://qima-lifesciences.com/wp-content/uploads/2019/05/190527_Poster3_petit.png 368 655 Vanessa https://qima-lifesciences.com/wp-content/uploads/2021/10/QIMA_life_sciences@4x1.png Vanessa2019-05-22 14:37:122019-11-12 17:36:48Pharmacological effects of anti-androgens and other compounds in an androgen-sensitive sebocyte cell line.

Androgens activate lipogenesis through an AKT-independent mTOR pathway stimulation and a limitation of autophagy in an androgen-sensitive sebocyte cell line.

Acne, Acné, Peau grasse, hyperséborrhée et séborégulation, Sebaceous gland regulation

Androgens are key regulators of sebaceous function… A link between mTOR and androgen signaling has previously been reported…as well as a link between these processes and lipid synthesis…Here we aimed at confirming that DHT-induced lipid synthesis/accumulation is at least in part dependent on mTOR activation in the SEBO662AR cell line and that the autophagic process is consequently modified by the androgenic treatment.

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https://qima-lifesciences.com/wp-content/uploads/2019/05/190527_Poster4_petit.png 368 655 Vanessa https://qima-lifesciences.com/wp-content/uploads/2021/10/QIMA_life_sciences@4x1.png Vanessa2019-05-22 14:37:042019-11-12 17:39:16Androgens activate lipogenesis through an AKT-independent mTOR pathway stimulation and a limitation of autophagy in an androgen-sensitive sebocyte cell line.
Adapalene and benzoyl peroxide

A skincare combined with combination of adapalene and benzoyl peroxide provides a significant adjunctive efficacy and local tolerance benefit in adult women with mild acne

Acné, Acne

Acne in adult women is an increasing reason for dermatological consultations.

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https://qima-lifesciences.com/wp-content/uploads/2017/05/mw_Adapalene-and-benzoyl-peroxide.png 368 655 Julie https://qima-lifesciences.com/wp-content/uploads/2021/10/QIMA_life_sciences@4x1.png Julie2017-05-01 13:15:422021-08-30 13:27:21A skincare combined with combination of adapalene and benzoyl peroxide provides a significant adjunctive efficacy and local tolerance benefit in adult women with mild acne

Androgens induce sebaceous differentiation in sebocyte cells expressing a stable functional androgen receptor

Acne, Acné, Cell and tissue engineering, Ingénierie cellulaire et tissulaire, Sebaceous gland regulation, Vieillissement cutané

In order to study the impact of active androgens in sebocytes, we constructed a stable human sebocyte cell line derived from SEBO662 [17] constitutively expressing a fully functional AR. In these SEBO662 AR+ cells, dihydrotestosterone (DHT) induced AR nuclear translocation and the strong modulation of a set of transcripts (RASD1, GREB1…) known to be androgen-sensitive in other androgenic cells and tissues.

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https://qima-lifesciences.com/wp-content/uploads/2016/03/mw_androgens-induce-sebaceous-differentiation-in-sebocyte.jpg 368 655 Guillaume https://qima-lifesciences.com/wp-content/uploads/2021/10/QIMA_life_sciences@4x1.png Guillaume2015-04-09 15:47:492019-11-13 11:16:58Androgens induce sebaceous differentiation in sebocyte cells expressing a stable functional androgen receptor

Immortalized sebocytes SEBO662 can spontaneously differentiate into a sebaceous-like phenotype when cultured as a 3D epithelium

Acné, Acne, Cell and tissue engineering, Ingénierie cellulaire et tissulaire, Sebaceous gland regulation

SEBO662 multilayers spontaneously differentiate into a sebaceous-like structure as shown by the strong polarized expression of the late sebaceous marker EMA, the overexpression of some lipogenic markers and lipid production on the upper side of the epithelium.

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https://qima-lifesciences.com/wp-content/uploads/2016/05/mw_Immortalized-sebocytes.jpg 368 655 Guillaume https://qima-lifesciences.com/wp-content/uploads/2021/10/QIMA_life_sciences@4x1.png Guillaume2012-01-24 10:17:152019-11-13 11:28:55Immortalized sebocytes SEBO662 can spontaneously differentiate into a sebaceous-like phenotype when cultured as a 3D epithelium
skin inflammation

Keratinocytes as targets for cytokines in skin inflammation

Acne, Acné, Atopic dermatitis, Dermatite atopique, Dermatologie, Dermatology, Psoriasis, Psoriasis

Current knowledge about the effects of different cytokine families on keratinocytes, and more particularly theirinvolvement in skin inflammation and in the development of inflammatory skin diseases such as psoriasis

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https://qima-lifesciences.com/wp-content/uploads/2016/05/mw_Keratinocytes-as-targets-for-cytokines.jpg 368 655 Guillaume https://qima-lifesciences.com/wp-content/uploads/2021/10/QIMA_life_sciences@4x1.png Guillaume2008-11-20 14:50:532019-05-31 09:36:35Keratinocytes as targets for cytokines in skin inflammation
5-alpha-reductase

Expression of type 1 5-alpha-reductase and metabolism of testosterone in reconstructed human epidermis

Acné, Acne, Dermatologie, Dermatology

We analysed the potential of a human epidermal tissue reconstituted by cell culture (RHE, provided by SkinEthic Laboratories, Nice, France) as a model for assessing 5-alphaR activity.

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https://qima-lifesciences.com/wp-content/uploads/2016/05/mw_Expression-of-type-5alpha-reductase.jpg 368 655 Guillaume https://qima-lifesciences.com/wp-content/uploads/2021/10/QIMA_life_sciences@4x1.png Guillaume2000-12-10 13:36:372018-10-24 22:15:34Expression of type 1 5-alpha-reductase and metabolism of testosterone in reconstructed human epidermis

 

 

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    Consultez le site cnil.fr pour plus d’informations sur vos droits.

    Pour exercer ces droits vous pouvez nous contacter à l’aide du lien suivant Gestion des droits ou en écrivant à dpo-qima@agencergpd.eu.

    Si vous estimez, après nous avoir contactés, que vos droits « Informatique et Libertés » ne sont pas respectés, vous pouvez adresser une réclamation à la CNIL.

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Documentary Ressources_Flyer_Ceramides


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Documentary Resources


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Documentary Ressources_Webinar Brochure_Immunology testing_Access Request


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Documentary Ressources_Flyer_Allergenicity


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